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報告書

低温放射線重合による$$alpha$$-amylase固定の研究,3; 高濃度$$alpha$$-amylaseの2-ヒドロキシエチルメタクリレートによる固定

吉田 勝; 熊倉 稔; 嘉悦 勲

JAERI-M 6190, 13 Pages, 1975/07

JAERI-M-6190.pdf:0.51MB

単量体として、主としてHEMAを用い低温放射線重合により$$alpha$$-amylaseを固定化する研究を酵素量50~200mgの高濃度領域において検討した。酵素高濃度の場合の特徴は重合前の混合液の相分離が起りやすいことであり、50%HEMA濃度以上において著るしい相分離が起る。しかしながら、これを振盪によりサスペンジョン化して急冷凝固(-196$$^{circ}$$C)させ照射重合を行うことにより有効に固定化できることが判明した。0$$^{circ}$$C以下の温度ではこのような方法での固定化が可能であり、0$$^{circ}$$C以上になると相分離がおこるため酵素を固定化することができない。HEMAの重合性は0$$^{circ}$$Cを境にして変化し、0$$^{circ}$$C以下では重合速度が増加し、-24$$^{circ}$$Cで最大となることが認められた。これは、0$$^{circ}$$C以下で水の結晶化が起り相状態が変化するためと考えられる。

報告書

低温放射線重合による$$alpha$$-amylase固定の研究,2; 低濃度$$alpha$$-amylaseの2-ヒドロキシエチルメタクリレートによる固定化

吉田 勝; 熊倉 稔; 嘉悦 勲

JAERI-M 6189, 16 Pages, 1975/07

JAERI-M-6189.pdf:0.57MB

液化型$$alpha$$-amylaseをHEMAを使用して、著者らが開発した新しい包括法である低温放射線重合により固定化した結果、次のようなことが判明した。$$A$$-amylaseは0$$^{circ}$$C以下の照射温度においてHEMAにより有効に固定化され、その酵素固定化物の活性率は75~80%に達する。0$$^{circ}$$C以上の温度で固定化すると活性率は急激に低下する。最適固定化温度は-78$$^{circ}$$C~-24$$^{circ}$$Cであり、重合手段としては放射線による方法しかない。HEMAは放射線照射より、-78$$^{circ}$$C~-24$$^{circ}$$Cの低温でも容易に100%近く重合するので固定化相体としては非常に有利である。好適HEMA濃度は30%以下であり、これ以上になると活性率は急激に低下する。また、最適照射線量は1$$times$$10$$^{6}$$Rで、照射線量が5$$times$$10$$^{6}$$R以上になると活性率の低下が認められた。HEMA重合体は重合完結と同時にすでに多孔質化したゲル構造を有するので酵素反応はそのままの状態でおこなうことができる。

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